Transformação genética em macieira, com o gene bvlI.
Abstract
O objetivo principal do presente trabalho foi introduzir o gene bvlI com potencial
antifúngíco confirmado da lectina de Bauhinia variegata, em macieira (Malus domestica
Borkh), cv. Gala, para estabelecer resistência ao fungo Coletotrichum gloeosporioides,
causador da Mancha Foliar. Foram realizados experimentos de multiplicação in vitro,
regeneração de explantes foliares e, dois protocolos de transformação via
Agrobacterium tumefaciens visando a inserção do gene bvll. Na multiplicação de
brotações o meio que apresentou melhores resultados foi o MS suplementado com 0,1
mg L-1 ANA e 8,3 mg L-1 de 2iP e, para a regeneração as melhores respostas foram
obtidas com meio MS, suplementado com 30 g L-1 de sorbitol, 0,5 mg L-1 ANA e 5 mg L1
de TDZ, atingindo um percentual de 94,5% de regenerações. Quanto aos protocolos
de transformação, o que apresentou melhores resultados foi o protocolo P1, no qual
através da análise de PCR foram obtidas 15% de brotações contendo o gene bv/l. No
entanto, a expressão da proteína BVLI não foi detectada através de Dot Blot, indicando
a necessidade de novos procedimentos, como refinamento do protocolo de extração de
proteínas, bem como utulização de outras técnicas de análises, como Real Time.