Expressão heteróloga e utilização da proteína recombinante EMA-1 de Theileria equi como imunobiológico
Abstract
A Theileriose eqüina é considerada uma das principais doenças parasitárias que
acometem os eqüinos, acarretando grande impacto econômico na equinocultura. A
doença é causada pelo hematozoário Theileria equi. As perdas econômicas
associadas à theileriose eqüina estão relacionadas tanto aos fatores clínicos, quanto
à restrição ao trânsito internacional de animais soropositivos, já que animais
portadores crônicos são passíveis de reagudizações, gerando perda de performance
física e reprodutiva, e são potencialmente disseminadores da enfermidade. Nos
últimos anos, os estudos sobre o diagnóstico imunológico e vacinação contra T. equi
concentram-se na obtenção de frações antigênicas. Na membrana externa deste
protozoário foram caracterizadas proteínas principais de superfície denominadas de
EMAs (equi merozoite antigen). Dentre estas, a EMA-1 destaca-se como antígeno
para diagnóstico em função de sua conservação entre diversos isolados. Seu papel
também tem sido caracterizado como imunógeno por estimular forte resposta
humoral com produção de anticorpos em animais infectados, podendo ser usado
como ferramenta para imunodiagnóstico dessa doença. EMA-1 é também um
potencial candidato como antígeno vacinal no controle da theileriose equina. Neste
estudo utilizou-se o sistema eucariótico de expressão baseado na levedura
metilotrófica Pichia pastoris, para a produção da proteína EMA-1 de T. equi e a
avaliação quanto a sua antigenicidade e imunogenicidade. Quanto a sua
antigenicidade, a proteína recombinante foi reconhecida por anticorpos de animais
portadores crônicos de T. equi, sugerindo que epítopos nativos foram conservados
na proteína recombinante. Também foi observado que a proteína recombinante foi
capaz de gerar resposta imune em camundongos vacinados com esta proteína. Os
dados obtidos neste estudo demonstram que a levedura P. pastoris é um sistema de
expressão heterólogo adequado para a produção da proteína EMA-1 de T. equi,
podendo ser utilizada como imunobiológico no desenvolvimento de testes
diagnósticos e vacina recombinante.