Anticorpos monoclonais contra as proteínas LigA e LigB de leptospiras patogênicas:produção e caracterização
Fecha
2007-02-05Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
As proteínas leptospiral immu oglobuli -like (Lig)estão expostas na superfície da
membrana das leptospiras patogênicas e podem estar envolvidas no ataque e
penetração às células do hospedeiro durante a infecção.Recentemente,foi
identificado um par de Ligs,nomeadas LigA e LigB,com regiões polipeptídicas
idênticas e não-idênticas.As duas proteínas estimulam uma resposta humoral forte
durante a infecção aguda no hospedeiro e têm sido sugeridas como alvos para o
desenvolvimento de vacinas e testes diagnósticos para leptospirose.Este estudo
relata a produção e caracterização de anticorpos monoclonais (Mabs)contra
fragmentos recombinantes não idênticos de LigA (rLigANI)e LigB (rLigBNI).Os
fragmentos recombinantes foram utilizados para a imunização dos camundongos e
triagem dos hibridomas por ELISA indireto.Quatro Mabs obtidos contra rLigANI e 6
Mabs contra rLigBNI foram isotipados e avaliados quanto ao seu potencial para uso
em estudos de imunoproteção e desenvolvimento de testes diagnósticos.Os Mabs
foram dos isotipos IgM (1),Ig 2b (3)and Ig 1 (6)e reagiram com as proteínas nativas
de Leptospira i terroga s sorovar Copenhageni cepa L1 130 em ELISA indireto e
imunofluorescência.A constante de afinidade dos Mabs manteve-se entre 4x10 7 M -1
and 2x10 8 M -1 ,e o mapeamento de epitopos por ELISA de aditividade demonstrou
que cada Mab reage com o mesmo epitopo na molécula recombinante ou causa um
impedimento espacial (steric hi dra ce ).Finalmente,os Mabs reagiram
positivamente em testes imuno-histoquímicos de seções do tecido renal de hamsters
experimentalmente infectados com leptospiras.Esses dados sugerem que os Mabs
obtidos podem ser usados para estudos de imunoproteção e desenvolvimento de
testes de diagnóstico de leptospirose.