Utilização de proteínas quiméricas de Bartonella henselae para desenvolvimento de testes diagnósticos em felinos
Resumo
A bactéria Bartonella henselae tem grande importância em saúde única, por causar infecções agudas e crônicas em animais domésticos, silvestres e humanos. Embora a maioria dos casos sejam autolimitantes ou assintomáticos, podem ocorrer infecções graves e até fatais especialmente em pacientes imunocomprometidos. As infecções persistentes podem produzir manifestações clínicas diversas, ainda precariamente caracterizadas nos felinos, além desta ser a espécie com maior potencial zoonótico. O diagnóstico de bartonelose ainda é desafiador, visto que as técnicas convencionais atualmente utilizadas apresentam limitações. Portanto, a busca por novos ensaios para o diagnóstico da infecção por B. henselae é de considerável interesse. Assim, objetivou-se avaliar a atividade antigênica de proteínas quiméricas recombinantes sintetizadas a partir de epítopos imunogênicos de B. henselae para detecção de anticorpos específicos em amostras de felinos. Três proteínas quiméricas recombinantes foram utilizadas nesse estudo (rQ1, rQ2 e rQ3), tendo sua antigenicidade contra soros de felinos avaliada por Western blotting. Já o reconhecimento das quimeras por anticorpos anti-Bartonella presentes em 145 amostras de soros felinos foi verificada por ELISA indireto, pelo teste denominado ELISA Feline Bartonella (EFB). Foi realizada uma análise de aderência do EFB, utilizando as métricas de acurácia, sensibilidade, especificidade e área sob a curva ROC (AUROC). A sensibilidade, a especificidade, o valor preditivo positivo, o valor preditivo negativo e a acurácia do EFB na detecção de anticorpos anti-Bartonella foram comparadas com os resultados do teste de imunofluorescência indireta (IFA), para analisar sua possível aplicação como método de triagem e/ou de confirmação no diagnóstico sorológico da bartonelose felina. As proteínas quiméricas detectaram a presença de anticorpos contra B. henselae em amostras de soros felinos, e ainda, todas as amostras reativas para bartonelose no teste proposto (EFB) (n = 4) foram reativas também no teste padrão ouro (IFA). Observou-se 04 amostras reativas nos dois testes e outras 04 amostras reativas apenas na IFA. Ao analisar amostras de felinos oriundos de comunidades socialmente vulneráveis de Pelotas- RS foi identificada a presença de infecção por B. henselae. Na avaliação dos parâmetros hematológicos e bioquímicos entre os grupos reagentes e não reagentes na IFA, a única alteração encontrada foi nos níveis de albumina, não mostrando relevância clínica. Em síntese, as proteínas quiméricas recombinantes mostraram-se promissoras, e poderão ser utilizadas como insumos no desenvolvimento de testes de diagnóstico de bartonelose felina.