Tristeza parasitária bovina: diagnóstico molecular, efeito sobre a fertilidade e desenvolvimento de um produto para prevenção
Resumo
Anaplasma marginale e Babesia spp. são parasitas, causadores de anemia hemolítica
em bovinos e compõem o complexo de doenças tristeza parasitária bovina (TPB). A
TPB é de caráter endêmico na maior parte do território brasileiro, gerando prejuízos
econômicos significativos. O diagnóstico de maior sensibilidade é obtido através de
técnicas moleculares. Portanto, o objetivo dessa tese foi compilar trabalhos sobre a
ocorrência de A. marginale e Babesia spp., através de técnicas moleculares, no Brasil,
verificar a influência destes parasitas sobre parâmetros hematológicos e taxa de
concepção de novilhas Angus e desenvolver um veículo de liberação lenta e
prolongada para prevenção da TPB. Inicialmente foi realizada uma revisão
sistemática, com busca sobre estudos que utilizaram técnicas moleculares para
detecção de A. marginale e Babesia spp. em bovinos no território brasileiro. Ao todo,
38 trabalhos foram incluídos na revisão, sendo a maior ocorrência de A. marginale e
B. bovis encontradas no estado de Roraima (98,78% e 95,47%, respectivamente) e
de B. bigemina no estado de São Paulo (86,25%). Para verificar o impacto da infecção
por estes hemoparasitas na taxa de concepção, 94 novilhas Angus foram inseridas
em protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF). Amostras de sangue
foram coletadas no início do protocolo (D-10) e no dia do diagnóstico de gestação
(D+34) para determinação de variáveis hematológicas. Uma alíquota de sangue do D-
10 foi utilizada para extração de DNA genômico total (gDNA) e todas as amostras
foram submetidas a PCR quantitativa (qPCR) para investigação de genes alvo para
A. marginale e B. bovis. Todas as amostras positivas para B. bovis foram submetidas
a quantificação absoluta, determinando número de cópias (CN) de B. bigemina e B.
bovis. Foram realizadas comparações entre os grupos prenhes (P) e não prenhes
(NP) e correlação entre o CN e parâmetros hematológicos. A taxa de concepção ao
primeiro serviço foi 47,87% (45/94), somente no D-10 o NP apresentou hemoglobina
maior que o P. Todas as novilhas foram positivas para A. marginale e B. bovis na
qPCR, enquanto na quantificação absoluta, seis novilhas foram negativas para B.
bigemina (quatro P e duas NP) e duas negativas para B. bovis, uma de cada grupo.
Não houve diferença com relação CN e correlação significativa foi encontrada apenas
entre hemoglobina/eritrócito (P<0,0001; r=0,8082) e hemoglobina/hematócrito
(P=0,0049; r = 0,3009), respectivamente. Para estratégia inovadora para prevenção
da TPB, foi desenvolvida uma emulsão de liberação lenta e sustentada, realizando
testes de liberação in vitro, e comparando com formulação comercial, e teste para
verificar dor e/ou reações no local de aplicação. Nos testes in vitro, as liberações
ocorreram de forma mais lenta quando comparadas ao produto comercial. Já no testecom animais, foi notado aumento de volume no local de aplicação, sem manifestações
de dor significativa. Conclui-se que, a ocorrência de A. marginale e Babesia spp.
variou de 7,32% a 98,78% e, apesar da quantidade de dados encontrados sobre a
ocorrência e uso de diagnóstico molecular, ainda há lacunas e oportunidades de
pesquisa, principalmente sobre a quantificação de perdas nos rebanhos de maior
ocorrência de TPB, e para o desenvolvimento de formulações para prevenção destas
doenças.