Lipid modulators during in vitro maturation of porcine oocytes

Abstract

A produção de embriões suínos in vitro (PIVE) possui limitações para melhores resultados em biotecnologias reprodutivas. Dentre os fatores prejudiciais na PIVE, o alto teor lipídico em oócitos e embriões, a composição insuficiente do meio e a consequente produção de espécies reativas de oxigênio (EROS) são as mais proeminentes. O 1º artigo desta dissertação revisa sobre metabolizadores incluídos no sistema de PIVE, a fim de sustentar a maturação nuclear e citoplasmática, bem como a melhoria do consumo de gotículas lipídicas (GL). O 2º artigo relata um estudo onde 50μM DHA foi adicionado durante o período de maturação, com e sem suplementação de fluído folicular suíno (FFp). Os resultados demonstraram que DHA sem FFp prejudica a maturação e o desenvolvimento embrionário. Além disso, não houve redução do conteúdo lipídico em oócitos tratados com DHA, o que pode estar relacionado a distúrbios metabólicos no complexo cumulus-oócito (CCO). Durante a maturação, oócitos suínos preferem glicose como substrato para consumo de energia. O etosulfato de fenazina (PES) é um receptor de elétrons capaz de converter NADPH em NADP, induzindo a utilização de glicose através da via de pentose fosfato (PPP), influenciando o metabolismo lipídico. Forskolin (FSK) é outro modulador químico que estimula a lipólise através da ativação do AMPc, podendo também sincronizar a maturação citoplasmática e nuclear de oócitos. No último artigo, duas concentrações de PES (0,5μM e 0,05μM) e uma de FSK (10μM) foram utilizadas durante todo o período de maturação in vitro, para dois experimentos diferentes. No Experimento 1, a maturação oócitária e o conteúdo lipídico foram avaliados; o desenvolvimento embrionário, a contagem de células embrionárias e o conteúdo lipídico de blastocistos no dia 7 foram avaliados no Experimento 2. A concentração de 0,5μM de PES teve um impacto negativo na maioria dos parâmetros avaliados, enquanto a menor dose de PES foi semelhante ao controle negativo (CN) e ao controle de FSK em ambos os dados do Experimento 1, obtendo também taxas menores de clivagem quando comparada ao CN no Experimento 2. Em conjunto, nossos resultados demonstraram comprometimento do desenvolvimento embrionário devido à possível desarmonia na maturação oócito e transtorno do metabolismo causada pela adição de DHA ou PES. Além disso, FSK não melhorou as taxas de maturação ou reduziu o conteúdo lipídico.