Desenvolvimento de um ELISA indireto com antígenos recombinantes para detecção de anticorpos contra Mycoplasma hyopneumoniae
Resumo
O Mycoplasma hyopneumoniae é o agente etiológico da Pneumonia Enzoótica Suína (PES), uma das principais doenças respiratórias que acomete suínos no mundo. Esta doença é caracterizada por retardo no desenvolvimento, principalmente em animais em fase de crescimento e terminação, ocasionando perdas econômicas significativas no rebanho. O diagnóstico presuntivo é baseado em sinais clínicos e na presença de lesões, no entanto, testes laboratoriais são necessários para o diagnóstico conclusivo da doença. Embora o cultivo do agente seja considerado o padrão ouro, o mesmo não é usado como rotina, devido ao crescimento extremamente lento deste agente e a interferência por outros micoplasmas. Desta forma, há a necessidade do desenvolvimento de métodos de diagnósticos mais sensíveis e específicos para esta doença. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um ELISA indireto para a detecção de anticorpos contra M. hyopneumoniae. Para isso, foram testadas individualmente seis proteínas recombinantes de M. hyopneumoniae expressas em E. coli, consideradas espécie-específica (P46, P95, P97 like, P102AB, Lppt e proteína hipotética 987), utilizadas como antígeno na sensibilização de placas de ELISA. Cada uma destas proteínas foi confrontada com 3 categorias de soros de suínos. A sensibilidade e especificidade obtida para cada uma das proteínas foram respectivamente as seguintes: P95, 74,3% e 97,6%; P46, 53,7% e 97,6%; Lppt, 28,4% e 97,2%; 987, 27,1% e 96,1%; P102AB, 65,5% e 97,6%; P97 like, 72,6% e 97,2%. Usando o ponto de corte definido, foi calculado o valor preditivo positivo que variou de 17,4% (para prevalências de 10%) a 99,4% (para prevalências de 90%), e o valor preditivo negativo que variou de 34,5% a 99,5% dependendo da prevalência da doença em uma determinada área. Estes dados mostram que proteínas como a P95, P46, P102AB e P97 like são potenciais alvos para uso em testes de diagnóstico para detecção de anticorpos contra M. hyopneumoniae.